四川羊(yáng)肚菌菌种(zhǒng)生产基地浅谈羊肚菌菌种的(de)培育方法
发(fā)布日期:2019-05-06
本(běn)技(jì)术公开了(le)一种中药材的优质高产种植(zhí)方(fāng)法。该方法(fǎ)包括以下步骤:(1)母种的制作及培养,包括①制(zhì)作母种(zhǒng)培养基:将250g土豆、30g琼脂、25g葡萄糖(táng)和3g维生素B放(fàng)入2000ml的水中加热,直至琼脂完全煮化即得母(mǔ)种培养基(jī),②培育母种:将试管放入密(mì)封的无菌接种箱(xiāng)中(zhōng),每(měi)个试管中接入(rù)1cm×1cm的(de)菌丝后,置于20℃培养箱(xiāng)中,直至生长成母种;(2)原种的制作及培养,包括①制作原种培养基:取小(xiǎo)麦80%、木销10%和麦麸10%,将所述小麦煮(zhǔ)熟后捞出(chū),与所述木销和麦麸搅(jiǎo)拌均匀,水分控制在60-80%,100℃下保温(wēn)6小时,②培育原种;(3)栽培中的制作及培养,包括①制(zhì)作栽培(péi)种培养基和②培(péi)育栽培种(zhǒng)。本技术中,培(péi)育(yù)出优良的羊肚菌菌种,提高了种植的(de)存活率。
具体实施方式
一种(zhǒng)羊肚菌(jun1)菌种的培育(yù)方法,该方法(fǎ)包括以(yǐ)下步骤:
(1)母(mǔ)种(zhǒng)的(de)制作及(jí)培养
①制(zhì)作母种培养基:将250g土豆(dòu),30g琼脂(zhī),25g葡(pú)萄糖和3g维(wéi)生素(sù)B放入(rù)2000m1
的水中加热(rè),直至琼脂完(wán)全煮化即得母种培养基;
②培育母种:取所述(shù)母(mǔ)种(zhǒng)培(péi)养基 200ml装入300ml的(de)试管中,用棉花塞住管口,将所述试管放在125℃的高(gāo)压灭菌锅(guō)内灭菌1. 5h冷(lěng)却至室温(wēn)后,将所述试管放入密封的无菌接(jiē)种(zhǒng)箱中,每个试管中接入1cmX 1cm的(de)菌丝(sī)后,置于20℃培养箱(xiāng)中,直至生长成母种。
在步(bù)骤(1)中,土豆需要预先放入水(shuǐ)中(zhōng)煮(zhǔ)半小时,之后将其捞(lāo)山,再与琼脂、葡萄糖、维生素B一起放入水(shuǐ)中煮,直至琼脂煮化,将煮好的培养基放在试管(guǎn)里,等(děng)凝固之(zhī)后(hòu),再用棉花寒(hán)住试管的管口。进行母种的(de)培育(yù)时,在将试管放入(rù)接种箱之(zhī)前,还需要(yào)用75%的酒精擦拭试管,对试管的外壁进行(háng)洒精消毒(dú)。
在将试管放进无菌接种箱内时,还需要将用(yòng)于接种的下其一同放进接(jiē)种箱的(de),如:托(tuō)盘、酒精灯、打火机(jī)、器皿(mǐn)、接种(zhǒng)钩、镊(niè)子等一起放入接种箱内进行消(xiāo)毒处理(lǐ).对于(yú)接(jiē)种箱内的消毒(dú)处理(lǐ),可以将装有高锰(měng)酸钾(jiǎ)和甲醛混合物的被子放入接种箱内,消毒时保(bǎo)证接种(zhǒng)箱的密封。
(2)原种的(de)制作及培养(yǎng)
①制作(zuò)原种培养基:以(yǐ)质量分数计,取小(xiǎo)麦80
%、木销10%和麦(mài)麸(fū)10%,将所(suǒ)述小麦煮熟后(hòu)捞出,与所述(shù)木销和麦数搅拌均(jun1)匀,水(shuǐ)分控(kòng)制在60-80 %
,装入培养瓶(píng)中,瓶口用(yòng)棉花塞住,将(jiāng)所述培养(yǎng)瓶放(fàng)在火(huǒ)菌(jun1)锅里火菌后,100℃下保温6小时,取(qǔ)出冷却后即得原种培养基;
②培(péi)育原种:将所述培养瓶和装有母种的试管放入(rù)接(jiē)种箱中密(mì)封(fēng)半小时后,再将(jiāng)试(shì)管中(zhōng)的毋种接入(rù)到(dào)所述(shù)原种培养基的培养(yǎng)瓶中,保持温度20℃即可。
(3)较培中的(de)制作及培养
①制(zhì)作栽(zāi)培种培(péi)养基:以质量分(fèn)数计,取(qǔ)小麦75%煮熟后捞(lāo)出,放(fàng)入(rù)15%木(mù)销、
5%麦麸和(hé)5%泥上(shàng)搅拌均匀,含水量60% -80%.装入聚丙烯(xī)袋中(zhōng)封口,将所述聚丙烯(xī)袋放在灭菌锅(guō)里灭(miè)菌.常压100℃下保存4小(xiǎo)时,取出冷(lěng)却至室温:
②培育(yù)栽培种:将所述(shù)聚丙(bǐng)烯(xī)袋(dài)和原种培养基的培养瓶置于接(jiē)种箱中(zhōng)密封半小时后,再将步骤(2)培(péi)养的原(yuán)种接入到所述(shù)聚丙烯(xī)袋巾,在20℃环(huán)境下培养15-20天可获(huò)得栽培种。
在上述的步骤(1)之前,还需要(yào)采集新鲜的羊(yáng)肚(dù)菌子实体,将子实体切(qiē)成直(zhí)径
2-3mm的菌块,取经过高压(yā)灭菌的PDA培养(yǎng)纂(zuǎn),将所述菌块放在PDA培(péi)养基上,将(jiāng)所述PDA培(péi)养基置于20℃的培养(yǎng)箱中,,周后(hòu)可获得(dé)菌(jun1)丝(sī)。
在本方(fāng)案中,接种箱始终处(chù)于无菌状(zhuàng)态,在(zài)进行培养基的接种处理时,在接种箱内放入一杯装(zhuāng)有(yǒu)高锰酸钾(jiǎ)和甲醉的(de)混合液体,用(yòng)于对接种(zhǒng)箱内的空(kōng)气进(jìn)行(háng)杀菌消毒(dú)处(chù)理。
与现有技(jì)术相比(bǐ).本(běn)技术实施例具有以下(xià)优点:
通过应用本技术实施例(lì)的(de)技术方案,在羊肚菌菌种(zhǒng)的培育过程中,通过对现有技术中(zhōng)的(de)培养基(jī)配方(fāng)进行改进,在菌种培(péi)育(yù)的各阶段采用不同的培养基达(dá)到最好的培育效(xiào)果,木方案提供的菌种培(péi)育方(fāng)法,培(péi)育出的羊肚菌菌种品质优良,同时,大大提高了羊肚菌种植的存活(huó)率。